3 檢測(cè)
擴(kuò)展基因代碼方便對(duì)比
地點(diǎn):生物防護(hù)二級(jí)實(shí)驗(yàn)室(PCR實(shí)驗(yàn)室)
試管中的基因片段隨后將送進(jìn)PCR實(shí)驗(yàn)室。
李曉丹說(shuō),PCR儀是核酸檢測(cè)病毒的關(guān)鍵設(shè)備。最近幾天,他們針對(duì)甲型H1N1流感開發(fā)的檢測(cè)試劑盒,就將在這個(gè)環(huán)節(jié)發(fā)揮主要作用。
實(shí)驗(yàn)人員將試管內(nèi)的一組基因片段放入檢測(cè)試劑配置的反應(yīng)液中,再置于PCR儀下,大概兩個(gè)半小時(shí)左右,每個(gè)基因片段都被放大,生成了大小不一的核酸擴(kuò)展物CDNA(基因片段擴(kuò)展物)。
同時(shí),另一部分通過(guò)反應(yīng)液,被分裝在PCR小試管內(nèi)的核酸RNA(核糖核酸),則可以在特制模板中,通過(guò)與目標(biāo)病毒基因片段的定時(shí)定量比對(duì),由實(shí)驗(yàn)人員讀出結(jié)果:是否為甲型H1N1流感病毒。
李曉丹說(shuō),為了確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確無(wú)誤差,這個(gè)定時(shí)定量PCR檢測(cè)結(jié)果,只作為整個(gè)甲型H1N1流感病毒追索結(jié)論的一個(gè)參考。
4 確診
電泳膠內(nèi)篩顯病毒“原形”
地點(diǎn):生物防護(hù)一級(jí)實(shí)驗(yàn)室(綜合實(shí)驗(yàn)室)
裝有不同基因片段擴(kuò)展物的微小試管被送進(jìn)綜合實(shí)驗(yàn)室,這里的關(guān)鍵設(shè)備是盛滿了瓊脂糖凝膠、兩頭插著正負(fù)電極的矩形電泳檢測(cè)儀。
利用移液器,實(shí)驗(yàn)人員將試管中微量的無(wú)色透明液體染色后,再放入充了電的膠“池”。
在電壓牽引推動(dòng)下,膠池的表面開始密集冒起小氣泡,“那是病毒的基因擴(kuò)展物在向另一個(gè)方向走,個(gè)頭大的產(chǎn)物走得慢,越是個(gè)頭小的產(chǎn)物走得越快!崩顣缘ふf(shuō),瓊脂糖凝膠電泳儀就像一面篩子,把病毒中每個(gè)基因片段都以特定的“大”、“小”影像顯現(xiàn)出來(lái)。
當(dāng)然,上述景象人的肉眼無(wú)法看到。實(shí)驗(yàn)人員讓“膠池”充電40分鐘,確保所有的擴(kuò)展物都“運(yùn)動(dòng)”起來(lái)后,將“膠池”放進(jìn)另一個(gè)特制的方形“鐵柜”中,這其實(shí)是一部紫外線下工作的“照相機(jī)”———凝膠成像儀。
成像儀內(nèi),紫外線燈發(fā)光,照射在凝膠上,然后對(duì)膠中染色發(fā)光的擴(kuò)展物自動(dòng)拍照,并輸出在連接的電腦屏幕上。
李曉丹介紹,電腦中還能同時(shí)調(diào)出甲型H1N1流感病毒基因序列圖,在同一個(gè)位置上,受檢病毒的數(shù)個(gè)基因片段擴(kuò)展物大小與參照物完全相合,就能夠最終判斷,標(biāo)本送檢患者感染了甲型H1N1流感病毒。
反之,排除感染可能。
李曉丹說(shuō),從病毒標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室到最終檢測(cè)出結(jié)果,約需4—6小時(shí)。
甲型H1N1病毒檢測(cè)程序
醫(yī)生對(duì)疑似患者的鼻液或喉液取樣
送入流感網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室
提取多個(gè)基因片段,對(duì)逐個(gè)基因片段進(jìn)行擴(kuò)展(放大)
擴(kuò)展物入膠染色,在紫外線燈下發(fā)光成像
與電腦中儲(chǔ)存的目標(biāo)病毒基因片段對(duì)比,同一位置上,大小是否完全一致
若一致則能夠最終判斷,標(biāo)本送檢患者感染了甲型H1N1流感病毒
本組稿件采寫/本報(bào)記者 魏銘言 本組稿件攝影/本報(bào)記者 王申
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